Teemme myös PCR-kokeita, miksi tulokset ovat aina niin paljon huonompia kuin muut?

Teemme myös PCR-kokeita, miksi tulokset ovat aina niin paljon huonompia kuin muut?

Katsokaa laboratoriossa muiden ihmisten PCR: ää, monistustehokkuus on korkea, elektroforeesiliuska on täydellinen ja katsokaa omaa, vaikea tehdä pitkään, tuntevat reaktion olevan erittäin hyvä, väärän positiivisen testin tulos ongelma?

Uskon, että myös monet kumppanimme ovat kohdanneet erilaisia ​​ongelmia. Kun törmäämme seinään PCR-kokeissa, analysoimme alitajuisesti reaktiojärjestelmän tekijöitä, mutta jätämme usein huomiotta kulutustarvikkeiden tärkeän vaikutuksen kokeissa.

PCR-tulos on väärä, PCR-tarvikkeet voivat olla olennainen syy. Toisaalta kulutushyödykkeiden mikrokontaminaatio tai estäjien käyttöönotto aiheuttaa kokeellista pilaantumista; Toisaalta epäasianmukainen kulutusosien valinta saa myös kokeelliset tulokset kärsimään.

Ongelma tulee jälleen. PCR-tarvikkeita on monenlaisia, joten miten valita oikeat, jotta kokeilu sujuisi sujuvammin? Mihin ongelmiin on kiinnitettävä huomiota? Älä huoli, tänäänI Yhdistettynä monien vuosien kokemukseen, PCR-tarvikkeiden valinnassa esiintyvien yleisten ongelmien selvittämisessä toivon auttavan sinua.

 

Kysymys 1: Miksi PCR-tarvikkeet tehdään yleensä PP-materiaalista?

Huida: Koska PCR-tarvikkeet ovat yleensä suorassa kosketuksessa reagenssien tai näytteiden kanssa, polypropyleenimateriaalit (PP) ovat biologisesti inerttejä, eivät tartu biomolekyyleihin ja niillä on hyvä kemiallinen sietokyky ja lämpötilatoleranssi (voidaan sulkea autopiirissä 121 ° C: ssa) ° C, kestää myös lämpötilamuutoksia lämpösyklin aikana).

 

Kysymys 2: Kuinka minun pitäisi valita erikokoisten PCR-putkien / levyjen välillä?

HUIDA: Valinnan tarkoitus: valitse oikeat tuotteet kokeellisten vaatimusten mukaisesti. Suurin osa PCR-putken koosta voi täyttää PCR-reaktion vaatimukset. Tämän perusteella on suositeltavaa valita ensin pieni tilavuusputki. Koska pienen tilavuuden omaavassa reaktioputkessa / -levyssä on pieni yläpuolinen tila, lämmönjohtavuus paranee ja haihtuminen vähenee. Samanaikaisesti on vältettävä liian suurien tai liian pienten näytteiden lisäämistä. Liian suuri määrä voi johtaa alentuneeseen lämmönjohtavuuteen, vuotoon ja ristikontaminaatioon, kun taas liian pieni voi johtaa näytteen haihtumishäviöön.

Yhteisten reaktioputkien tekniset tiedot ja tilavuudet:

Yksi / yhdistetty putki: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

96-kuoppalevy: 0,2 ml, 0,15 ml

384-kuoppalevy: 0,04 ml

 

Kysymys 3: Kun näytemäärä on pieni, valitsen yhden tai yhdistetyn putken, mutta miksi joillakin on tasainen kansi ja joillakin kupera kansi?

Huida: Kun näytemäärä on pieni, yksi putki tai yhdistetty putki ovat edullisia. Kuitenkin, kun reaktiotilavuus on suuri, yksittäinen putki on hallitseva, ja tilavuus voi olla 0,5 ml. Ja tasaisella kannella ja kuperalla päällyksellä on kullakin etu, erityinen voi viitata seuraaviin tietoihin.

Yksi putki: 0,2 ml ja 0,5 ml; Voi valita näytteen määrän joustavasti.

Liitäntäputki: 0,2 ml tai 0,15 ml on valinnainen; 8 tai 12 putkea ovat yleisiä.

Litteä kansi: voi tarjota tarkan fluoresenssisignaalin siirron qPCR: lle; Helppo kirjoittaa merkkejä.

Kupera kansi: kosketus PCR-instrumentin kuuman kannen kanssa paineen aiheuttaman reaktioputken muodonmuutoksen vähentämiseksi; Se vaikuttaa kuitenkin fluoresenssisignaalin lähetykseen, eikä sitä voida soveltaa qPCR-kokeeseen.

 

Kysymys 4: Miksi joillakin PCR-levyillä on hameet ja joillakin ei?

Huida: Itse asiassa PCR-levyn hame on suunniteltu mukautumaan paremmin automaatiosovelluksiin tarjoamalla instrumentille vakaa tuki ja mekaaninen kestävyys sekä parempi vakaus pipetointiprosessin aikana.

PCR-levyt jaetaan yleensä ei-hemline-, half-hemline- ja full-hemline -levyihin.

Ilman Levy: Soveltuu useimmille PCR-koneille tai qPCR-koneille, mutta ei automaatio-sovelluksiin. Vakaus ei ole korkea pipetointiprosessissa, joten sitä on käytettävä levytuen kanssa.

Puolihelmareunalevy: voidaan mukauttaa etiketti- tai viivakoodisovellukseen ja automaattiseen levitykseen ja sillä on hyvä pipetoinnin vakaus.

Täysi hameen reunalevy: soveltuu hyvin automaattisiin kokeellisiin sovelluksiin, voidaan myös mukauttaa etikettiin ja viivakoodin käyttöön. Sillä on hyvä mekaaninen lujuus, sitä voidaan käyttää pullistumismoduulin PCR-instrumentissa ja sillä on korkea vakaus pipetoinnissa.

 

Q5 :Miksi PCR-levyjen kulmat ja tarrat eivät ole täysin samat?

Huida: Se riippuu kulmaleikkauksen ja merkinnän vaikutuksesta.

Kulmaleikkaus: PCR-levyn kulmaleikkausasennon valinta riippuu sopivan instrumentin vaatimuksista helpon sijoittamisen varmistamiseksi.

Tunnistaminen: Aakkosnumeeriset markkerit PCR-levyillä auttavat tunnistamaan yksittäiset kuopat ja näytepaikat. Yleensä kohokuvioidulle digitaaliselle logolle tai kaiverretulle logolle. Joissakin automatisoiduissa sovelluksissa painetut ja merkityt reaktiolevyt ovat paremmin suljettuja.

 

K6: Miksi jotkut PCR-levyt ovat kuperia, kun taas toiset ovat tasaisia? Kumpi on parempi?

Huida: Mikä sopii, on parasta. On olemassa kahdenlaisia ​​yhteisiä PCR-levyjä: tasainen huokosmarginaali ja korkea huokosmarginaali.

Litteän reiän marginaalireaktiolevy, sopii useimmille PCR-laitteille.

Reaktiolevyt, joiden aukon reunat nousevat, helpottavat kalvon sulkeutumista ja vähentävät ristikontaminaation riskiä näytteiden välillä.

 

Huidalla on monen vuoden kokemus PCR-tuotteiden tuotannosta ja prosessoinnista sekä teollisuuden korkeat standardit. Tuotelinja on rikas ja pystyy vastaamaan suurimman osan PCR-kokeellisista sovelluksista. Tule ja valitse oikeat tuotteet kokeellisiin sovelluksiisi.

谷歌推广疫情产品PCR


Viestin aika: Kesä-03-2021